بهینه سازی روش استخراج DNA در Amygdalus spp

نویسندگان

سعید کدخدایی دانشجو کارشناسی ارشد دانشگاه تبریز

سید رضا طبائی عقدانی عضو هیات علمی موسسه تحقیقات جنگلها و مراتع،تهران

چکیده مقاله:

مقاله حاضر به ارائه روشی ساده جهت استخراج DNA ژنومی از گیاهان دارای متابولیتهای ثانویه زیاد می پردازد. در این روش برگهای جوان و برگهای نسبتاً مسن از گونه های مختلف بادام وحشی و نیز ارقام اهلی، به عنوان مواد گیاهی، مورد بررسی قرار گرفتند. دراین روش ازSDS به جای CTAB که عمدتاً برای استخراج DNAگیاهان حاوی پلی ساکارید زیاد بکارمیرود و نیز سارکوسیل که دارای هزینه نسبتاً بالایی می باشند، نمک NaCI با غلظت نسبتاً زیادی جهت حذف پلی ساکاریدها،PVPبه منظور حذف موادپلی فنلی، RNase برای از بین بردن RNAو دوتا سه مرتبه استخراج به وسیله کلروفرم: ایزوآمیل الکل،استفاده گردید.میانگین عملکرد DNA بدست آمده ازاین روش به صورت PG/G50 بافت برگی PG/G70 بافت برگی جوان و 30 میکروگرم بر گرم بافت برگی نسبتاً مسن)بوده. DNAاستخراج شده بدین روش ازتقریباًMG100 برگ گیاه، با استفاده از دستگاه اسپکتروفتومتر ونیز ژل آگارز آزمایش (ارزیابی) گردیدوکیفیت و کمیت مناسب ومقابل قبولی را نشان داد. تمامی این DNAها به طور کاملاً موفقیت آمیزی درواکنشهای PCR(به میزانng/pl5/. محلول واکنش) قابل تکثیربودند بنابراین به دلیل سادگی،کمیت وکفیت مناسبDNAبدست آمده وهزینه نسبتاً کمتر، استفاده ازاین روش برای سایرگیاهان خانوادهRosaceaeواحتمالاً خانواده دیگری که استخراج DNAآنها با مشکل همراه است مفید خواهد بود.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

ثبت نام

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

بهینه سازی استخراج DNA ژنومی باکتریایی به روش سیلیکاژل

Background & Objectives: Today, major progress has been made in molecular experiments. The first step towards improving these experiments is the accurate extraction of nucleic acid. In this study, a protocol for DNA extraction was proposed in accordance with silica gel method. DNA purification, developed based on the silica-gel-membrane technology, is a simple method, which involves three s...

متن کامل

بهینه سازی استخراج dna ژنومی باکتریایی به روش سیلیکاژل

سابقه و هدف:در عصر حاضر، آزمایشات مولکولی گسترش بسیاری پیدا نموده است. اولین گام در موفقیت این آزمایشات استخراج صحیح اسید نوکلئیک می باشد. در این مطالعه، دستور کاری برای استخراج dna براساس سلیکا ارائه گردیده است. خالص سازی dna براساس تکنولوژی غشاء سیلیکاژل یک روش ساده و شامل سه مرحله اتصال، شستشو و بازیابی می باشد. اسیدهای نوکلئیک برخلاف پلی ساکاریدها و پروتئی نها، در حضور نمک های کائوتروپیک ( ...

متن کامل

استخراج DNA از ریشه مو با روش نمکی بهینه یافته

The reliability and performance of the molecular diagnostic assays such as polymerase chain reaction (PCR), enzyme digestion and other applications are influence by quantity and quality of the extracted DNA strongly. Furthermore, to choose suitable and optimal tissue for genomic experiments nevertheless consider quantity and quality of the extracted DNA, we need to consider the comfort of sampl...

متن کامل

بهینه سازی روش فنول کلروفرم سیلیکا برای استخراج dna از نمونه استخوان های قدیمی

مقدمه: استخراج dna از نمونه استخوان های قدیمی همواره با مشکلات زیادی همراه است. روش فنول کلروفرم سیلیکا یکی از روش هائی است که به طور معمول برای این منظور استفاده می شود. در این مطالعه هدف بررسی و بهینه سازی مراحل این روش است. مواد و روش ها: dna 62 نمونه استخوان (دارای عمر 3 تا 11 سال) ابتدا با روش فنول کلروفرم معمولی و سپس با تغییر بعضی پارامترها استخراج شد . dna حاصل در هشت منطقه str به نام ه...

متن کامل